自動菌落計數(shù)儀利用圖像采集器采集圖像,通過計算機對圖像進行分析,自動計數(shù)和測量細菌在固體培養(yǎng)基上生長而形成的肉眼可見的菌落或菌斑,廣泛應(yīng)用于食品和飲料中的品質(zhì)和衛(wèi)生檢驗、水質(zhì)分析、乳及乳制品的檢測、醫(yī)院臨床檢驗、化妝品檢驗、環(huán)保監(jiān)測和藥品的品質(zhì)與質(zhì)量檢測等,符合國家標準及各相關(guān)行業(yè)有關(guān)規(guī)定,適用于微生物的菌落計數(shù)和計算等,是現(xiàn)代微生物檢測實驗室先進和高效的菌落計數(shù)儀。
一、成像硬件的選型
成像硬件用于獲得清晰有效的菌落圖像,以便分析計數(shù)。現(xiàn)今的成像硬件有拍照成像的、掃描成像的。由攝像頭拍照成像的優(yōu)點是:成像速度快,能確保在0.5秒內(nèi)獲得菌落圖像。由單反相機、卡片機拍照成像的優(yōu)點是:能自動對焦、且像素分辨率一般更高,但其成像需要3~4秒的時間。然而,拍照成像的致命弱點是:成像環(huán)境中的光線強度,無論是暗視野,還是背光,想要做到圖像中心與邊緣保持完全一致,是不可能的。從而引起平皿上亮度的不一致,這就嚴重干擾了菌落目標的自動識別。因此,如果要選購拍照成像的,其分析軟件就一定要具有背景矯正功能,以便自動改善成像的效果。掃描成像與在燈箱中營造均勻面光源不同,是將線光源通過移動變成面光源的,因此光線強度非常均勻,其均勻度通常比拍照燈箱的面光源要高一個數(shù)量級,從成像硬件的根本上解決了菌落目標的亮度不勻問題,因此計數(shù)分析非常穩(wěn)定。目前,以300dpi分辨率(3482×2396像素成像)掃描6個90mm直徑平皿的速度,暗視野成像約12秒、背光成像約20秒,就其成像速度而言,與單反相機、卡片機拍照成像的速度相當。由于掃描成像的光線均勻度遠遠高于拍照成像,為獲得高質(zhì)量的成像效果,以便實現(xiàn)“傻瓜式”分析。掃描成像的另一優(yōu)點是:成像分辨率可調(diào),單平皿成像最高可達4800dpi(即:25.4/4800=0.00529mm/像素),是任何拍照成像遠不及的。可以預期:掃描成像將很快成為主流選擇。
二、分析軟件的選型
分析軟件是自動菌落計數(shù)儀的另一塊核心成分。因為菌落生物的存在多樣性,在培養(yǎng)基上的表現(xiàn)或顯像不可能大體一致,針對這類變化,在分析軟件選型上要考慮:對于各類成像干擾的自動排出能力。比如:是否能自動矯正背景,等等。另外,對于嚴重粘連在一起的團裝、鏈狀分布菌落,將其自動分割開來的水平,也是評價分析軟件的考量指標。尤其是:對于同類菌落的“一鍵”化的智能分類計數(shù)能力,以及對于菌落計數(shù)分類的自動識別學習能力,更是評價分析軟件的關(guān)鍵考量指標。現(xiàn)在比較好的分析軟件,還集成了對6個90mm直徑平皿的抑菌圈全自動測量功能,以及對抗生素效價分析、藥敏分析功能,可避免用戶重復購置成像用的硬件。一般分析軟件都具應(yīng)具備對于分析結(jié)果和標記圖像的保存、查看功能。
三、精準、穩(wěn)定的傻瓜式操作
自動菌落計數(shù)儀就是為了減輕工作人員工作強度的,在現(xiàn)今的高技術(shù)下,若還需要估算才能測出菌落數(shù)的話,應(yīng)是比較落后了。最好的是:能“不變應(yīng)變”精準、穩(wěn)定地傻瓜式操作的分析軟件,其對于菌落形態(tài)和樣品狀態(tài)的不確定性,能夠自動適應(yīng),以避免不斷地調(diào)節(jié)菌落分割參數(shù),其最多由對話交互來擦除那些個污染部分,即可。
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